TECHNICAL COLUMN
学习资源1、抗原
蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。
2、免疫方式
皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。
3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例)
4、免疫方案(以免疫兔子为例)
5、注意:
第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合,以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原混合,采取多点,时间间隔式免疫法。
如果用细胞免疫兔子,那么每次免疫所需细胞量为 2-3 x 107 cells。
在连续免疫完三次后,需要少量取血进行 ELISA 检测,检测所免疫动物的抗体滴度,一般滴度能达到 1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加强一次免疫。
如果用小鼠免疫,可以尾静脉小量采血(大约 50ul),最后取眼球大量采血(大约 500-1000ul);如果用兔子免疫,可以耳缘静脉小量取血(大约 2mL),最后心脏大量取血(50-100mL)
按血清制备的标准方法将血清分离,并且分装成小份,储藏在-80oC。
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