Phalloidin是一种从致命的鹅膏菌中分离出来的毒素。它是一种与F-肌动蛋白特异性结合的双环肽（1）。这是一个非常方便的研究用荧光染料标记时F-肌动蛋白分布的工具。Phalloidin在半胱氨酸和色氨酸之间含有一个不寻常的硫醚桥形成内环结构的残留物。在升高的pH下，这种硫醚被裂解并且毒素失去了对肌动蛋白的亲和力。CF?染料是Biotium开发的一系列下一代荧光染料在亮度、光稳定性和水溶性方面具有综合优势与其他荧光染料相比。荧光标记鬼笔色素染色F-肌动蛋白在纳摩尔浓度下（1,3）。标记的鬼笔苷对两者具有相似的亲和力大小细丝，以约一个鬼笔肽的化学计量比结合来自不同物种的肌肉和非肌肉细胞中每个肌动蛋白亚单位的分子植物和动物。   

与抗体不同，鬼笔肽的结合亲和力在不同物种之间，肌动蛋白没有显著变化。非特定染色可以忽略不计，染色和未染色区域之间的对比度非常大。Phalloidin使单体/聚合物的平衡向聚合物，将聚合的临界浓度降低30倍(3,4). Phallotoxins还通过抑制引起的解聚来稳定F-肌动蛋白通过细胞松弛素、碘化钾和升高的温度。因为鬼笔肽偶联物较小，直径约为12-15?分子量＜2000道尔顿，多种肌动蛋白结合蛋白，包括肌球蛋白、原肌球蛋白和肌钙蛋白在用鬼笔色素。更重要的是，鬼笔肽标记的肌动蛋白丝仍然存在功能的标记的甘油化肌纤维仍然收缩，标记的肌动蛋白丝仍然在固相肌球蛋白底物上移动（5，6）。荧光鬼笔素也可用于量化细胞中F-肌动蛋白的量（7，8）。   

作为Biotium全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Biotium热销产品鬼笔环肽，CF 647。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

储备溶液的制备：

CF?染料鬼笔肽偶联物：将冻干固体溶解在甲醇或水中（对于300U尺寸为1.5mL或对于50U尺寸为0.25mL）以产生200 U/mL。  ; 

其他荧光鬼笔肽缀合物：将300 U冻干固体溶于1.5 mL以产生200U/mL（约6.6uM）的储备溶液。生物素XX鬼笔肽：将100U冻干固体溶解在1mL甲醇中，得到100U/mL（约10uM）的储备溶液。荧光鬼笔肽的一个单位（U）定义为所用材料的量对一张固定细胞的显微镜载玻片进行染色。对于荧光鬼笔素，一个单位是相当于在200μL的总染色体积中的5μL的200 U/mL储备溶液。对于生物素XX鬼笔肽，一个单位相当于10 uL的100 U/mL储备溶液总染色体积为200微升。

图：CF?488A与FITC相比的相对光稳定性。HeLa细胞用CF?488A或FITC鬼笔肽偶联物染色并连续暴露在使用汞弧灯显微镜的100X物镜下。图片为在t=0和t=5秒的光漂白下捕获   

文献参考：

• 1) Springer-Verlag New York. 47(1986);

• 2) J Muscle Res Cell Motil. 9, 370(1988);

• 3) Methods Enzymol. 85, 514(1982);

• 4) Eur J Biochem. 165, 125(1987);

• 5)Nature. 326, 805(1987);

• 6)Proc Natl Acad Sci USA. 83, 6272(1986);

• 7) Blood. 69,945(1987);

• 8) Anal Biochem. 200, 199(1992);

• 9) J Cell Biol 105. 1473(1987);

• 10)Proc Natl Acad Sci USA. 77, 980(1980);

• 11) Nature. 284, 405(1980);

• 12) CRC Crit Rev Biochem. 5, 185(1978);

• 13) J Cell Biol. 106, 1229(1988);

• 14) J Cell Biol. 103,265a(1986);

• 15) Eur J Cell Biol. 24, 176(1981);

• 16) Proc Natl Acad Sci USA. 74,5613(1977).

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